Hla типирование супругов 2 класса расшифровка: что это такое, как происходит расшифровка результатов?

Содержание

HLA типирование супругов. Что это такое, цена, анализ на генетическую совместимость, классы, расшифровка, как подготовиться

HLA типирование, которое расшифровывается от английского термина «Human Leukocyte Antigen» как антиген лейкоцитов человека, является сложным видом исследования биологической совместимости супругов и длительное время используется для предвидения вероятности неблагоприятного течения беременности.

Цена на HLA типирование бывает разной и зависит от объема исследования, который может включать тесты различной степени тканевой сочетаемости через проведение проверки реакции иммунитета, определения слабого генома и вероятности наследования генетических заболеваний.

Проводиться такое исследование при наличии показаний, которые могут провоцировать невозможность зачатия или вынашивания ребенка.

Наличие высокой степени совпадений генотипов является показателем, который включает ряд факторов, существенно снижающих вероятность продолжения рода в семье. При постановке положительного диагноза после HLA типирования вероятность иметь детей возможна только в случае нормальной совместимости супругов или прохождения комплексного лечения 1 или обоих супругов.

Содержание записи:

Показания к исследованию

Система биологической реакции HLA клеток в организме выполняет ряд функций:

  • дает иммунологическую реакцию на инфекции, бактерии и инъекции;
  • блокирует и удаляет раковые клетки;
  • организует и наращивает приобретенный иммунитет.

Однако это система оказывает существенное влияние на репродуктивные способности супругов, провоцируя бесплодие.HLA типирование супругов. Что это такое, цена, анализ на генетическую совместимость, классы, расшифровка, как подготовиться

Ранее HLA типирование применялось в медицине при пересадке органов и тканей для снижения уровня отторжения и увеличения вероятности полного выздоровления.

Расширенное исследование лейкоцитов человека позволило установить основной комплекс показателей совместимости между людьми, который напрямую связан с иммунитетом. Человеческий лейкоцитарный антиген кодируется генами и позволяет заранее установить вероятную совместимость между тканями разных людей. Сейчас HLA типирование широко применяется в лечении бесплодия.

Антигены HLA вырабатываются в крови и находятся на поверхности лейкоцитов. Они закладываются 3 генами, которые являются сочетанием генов родителей. Именно эти гены при их различии определяют качество зачатия и благополучную беременность, поэтому HLA типирование активно применяется для определения совместимости супругов при наличии проблем с репродуктивной системой.

HLA типирование супругов, цена на который достаточно высока, назначается в редких случаях. Перед прохождением типирования супруги проходят полное обследование для исключения заболеваний, которые могут повлиять на процесс размножения, и при необходимости лечение.

После общего обследования лечащий гинеколог специализированного центра может рекомендовать пройти HLA типирование при наличии ряда показаний, к которым относятся:

  • длительная невозможность зачатия в случае, когда женщина не использует контрацептивы;
  • постановка диагноза бесплодие по фактору схожести HLA антигенов;
  • постоянная не вынашиваемость плода (наличие 1 или более выкидышей). В этом случае врач исследует причины выкидыша и делает вывод о вероятности совпадения генов в супружеской паре;
  • неудачи при экстракорпоральном оплодотворении;
  • наличие родственных связей в паре;
  • при отрицательном резус-факторе крови у будущей матери;
  • мужчинам при наличии у них антигенов, которые влияют на выработку спермы и ее качество.

Назначается типирование лечащим гинекологом или андрологом-урологом в женской консультации или специализированном центре планирования семьи только после осмотра и прохождения минимального обследования. Анализ на HLA назначается обоим супругам, результат которого устанавливается в общем документе.

Как определяют

HLA типирование супругов, цена на который зависит от места его проведения, позволяет установить тип антигенов. Антитела бывают различных типов и классов. Для успешного вынашивания ребенка антитела супругов должны максимально различаться.

В этом случае организм женщины реагирует на появляющиеся клетки будущего организма ребенка выработкой антител-протекторов, которые снижают уровень агрессивных антигенов.HLA типирование супругов. Что это такое, цена, анализ на генетическую совместимость, классы, расшифровка, как подготовиться

В противном случае при совпадении типов антител вырабатывается в большом количестве NK клетки, которые начинают «убивать» новые клетки плода. Клетки организма матери принимают появившиеся новые клетки организма зародыша, как собственные и излишние. Как при опухолевом образовании иммунитет организма матери пытается «обезвредить» новые клетки, блокируя и уничтожая их.

HLA типирование помогает установить тип генов, которые присутствуют в крови супругов. Чем больше у женщины и мужчины количество совпадений генов, тем значительнее вероятность бесплодия и выкидышей. Так при 2 совпадениях аллеи HLA-генов вероятность благополучного зачатия и вынашивания ребенка снижается на 35 % в среднем.

При совпадении в 3 случаях, проблемы в продлении рода будут сопровождать 50 % пар. Большее количество совпадений делает вероятность рождения ребенка без квалифицированной медицинской помощи невозможным.HLA типирование супругов. Что это такое, цена, анализ на генетическую совместимость, классы, расшифровка, как подготовиться

Выявление количества совпадающих антител исследуется посредством 2 методик:

  • Серологического метода, при котором взятую у пациента кровь объединяют с сывороткой 2 пациента. В результате соединения в крови начинают выделяться антитела определенных генов, по которым определяется степень совместимости супругов. В этом случае количество выделяемых антител может не соответствовать действительности из-за неактивности отдельных клеток, поэтому анализ имеет точность 90 %;
  • молекулярно-генетической диагностики в виде сложной полимеразной цепной реакции (ПЦР), которая имеет большую точность. В этом случае врач-генетик выделяет и сравнивает отдельные участки нужной хромосомы, которая шифрует ген. Каждый ген имеет несколько аллей геномов и вариантов совпадений с клетками другого человека, поэтому исследование занимает много времени. Для исследования используются любые клетки, но лучше всего подходит материал со стенки полости рта или клетки крови.

Подготовка и проведение анализа

Проводиться исследование по лейкоцитам, содержащимся в крови супругов, которые выделяются из крови. Кровь для исследования берется из вены у обоих супругов, так и результат исследования оформляется на каждого из них. Особой подготовки к проведению исследования не требуется.

Однако для получения точных результатов рекомендуется:

  • не есть за 12 часов до исследования, поскольку оно проводиться натощак.
  • за 2 суток следует исключить из рациона алкогольные напитки и не курить;
  • убрать за 2 суток большие физические нагрузки для организма;
  • за 2 дня до проведения процедуры не принимать нежизненноважные лекарственные препараты;
  • исключить стрессовые ситуации, хорошо выспаться и отдохнуть.

В случае появления признаков простудного заболевания или недомогания прохождение анализа на HLA лучше отложить до полного выздоровления.

Исследование HLA совместимости проходит в специализированных медицинских лабораториях или центрах планирования семьи, имеющих лабораторию для исследования. Специальное оборудование и техника для подобного тестирования есть не везде, поэтому в ряде случаев материал после забора направляется для проверки в другие лаборатории или города. Клетки для HLA анализа получают из крови и слюны.

Забор крови из вены осуществляется квалифицированным специалистом в следующем порядке:

  • Пациент усаживается на удобное место и закатывает рукав правой руки выше локтя.
  • Рука плотно пережимается немного выше локтя специальным жгутом, и пациент несколько раз быстро сжимает кулак для облегчения нахождения вены.
  • Лаборант с помощью шприца делает прокол вены и жгут с руки снимается.
  • В шприц или стерильную пробирку лаборант набирает кровь до нужной отметки.
  • Затем иголка удаляется и на место прокола накладывается вата, смоченная в дезинфицирующем растворе.

После укола руку рекомендуется крепко зажать в локте на 15-20 мин., чтобы избежать кровоизлияний в соседние ткани.

Анализ занимает всего 5 мин и уже после взятия кровь разделяется на несколько проб. Нужное количество крови быстро загружаются в аппарат для отделения лейкоцитов и дальнейшего исследования.

Взятие мазка изо рта для проведения анализа посредством метода ПЦР проводиться специалистом.

Для этого:

  • Пациент усаживается и широко раскрывает рот.
  • Лаборант, аккуратно отодвигая щеку стерильной палочкой с ватным наконечником, несколько раз проводит по слизистой оболочке полости рта. Забор производиться с задней части щеки полости рта.
  • Ватная палочка с частицами клеток убирается в стерильный контейнер для исследования.HLA типирование супругов. Что это такое, цена, анализ на генетическую совместимость, классы, расшифровка, как подготовиться

При выявлении генов, которые влияют на качество спермы, анализ проходит только 1 муж.

Расшифровка результатов

HLA типирование супругов, цена которого в разных лабораториях может сильно отличаться, производят в течении 6-7 суток. Сам анализ делается 2 методами и требует проведения сложной работы по изучению HLA клеток. Все результаты исследования заносятся в специальную таблицу, которую можно прочитать и самостоятельно.

На каждого из супругов составляется своя таблица с подробными результатами исследования, поэтому в справке отдельно помечаются каждая группа проведенных анализов по каждому из пациентов.

Сама таблица объединяет 2 столба. В левом столбе таблицы перечисляются все виды белков DR и DQ. Шифры аллей генов прописываются развернуто (DRB1, DQA1, DQB1) с указанием точной цифровой ссылки на конкретный ген.

Проводят исследование количества генов с точностью до 2 или до 4. Указываются результаты 4 цифрами, которые по 2 разделяются через двоеточие или дробь. Первые 2 цифры означают номер группы вариантов генов, а вторые 2 цифры вариант гена этой группы.

Во второй столб вписывают варианты шифрованных генов белков, обнаруженных сверху на клетках. Они также обозначаются цифрами с разделением по 2 двоеточием.

Так при анализе у супругов в результатах обеих таблиц указано DQA1-01:01,05:01, таким образом у пары уже присутствует 1 совпадение и вероятность результативной беременности резко снижается. Тоже касается и остальных результатов исследования пар генов.HLA типирование супругов. Что это такое, цена, анализ на генетическую совместимость, классы, расшифровка, как подготовиться

В целом присутствие до 2 совпадений генов снижает уровень совместимости в паре на 35 %. До 50 % падает совместимость при наличии 3 совпадений. При одинаковых 4 и более генов вероятность беременности и вынашивания ребенка снижается до 0.

Количество совпадений генов белковСтепень совместимости супругов, %
1-2 65-80
350
4 и болееменее 10

По результатам анализа важно сделать правильные выводы. Неверная расшифровка исследования может привести к неправильному лечению и усугубить ситуацию.

За точной расшифровкой полученного результата следует обратиться к квалифицированному специалисту — гинекологу, урологу или репродуктологу, которые пояснят количество совпадений и вероятную совместимость между супругами. Врач может дать прогноз вероятности и порекомендовать необходимое лечение.HLA типирование супругов. Что это такое, цена, анализ на генетическую совместимость, классы, расшифровка, как подготовиться

Современные технологии существенно увеличили вероятность рождения ребенка даже при высокой степени совместимости супругов. Чаще всего для увеличения способности распознавания схожих генов супруга используется иммунотерапия, которая дает высокие результаты.

Специалисты даже при наличии 4 совпадений между генами супругов обладают методиками, способствующими благоприятному оплодотворению и вынашиванию ребенка.

Когда необходимо обратиться к врачу

HLA типирование супругов, цена и сложность проведения которого высоки, всегда проводиться только после назначения анализа узким специалистом. В редких случаях супруги могут самостоятельно пройти анализ на клеточную совместимость в медицинской лаборатории для устранения возможных сомнений.

В случае выявления 2 и более совпадений супругам необходимо обратиться к специалисту для прохождения обследования и постановки диагноза несовместимости. Такое тестирование является желательным при планировании прохождения экстракорпорального оплодотворения в целях недопущения в дальнейшем отрицательных последствий.

Поставить диагноз и провести осмотр может гинеколог или уролог. Однако для получения консультации о возможностях лечения с целью увеличения вероятности выносить здорового ребенка лучше сразу обратиться к репродуктологу или андрологу-урологу в центр планирования семьи.

Современные методики и лекарственные препараты позволяют снизить вероятность воздействия антител на развивающиеся клетки плода и дальнейшую беременность. Многим женщинам после назначенного лечения удавалось забеременеть и выносить ребенка при результатах HLA типирования в совпадении 4 и более генов.

Возможные осложнения

HLA типирование супругов, в отличие от других анализов, не становиться показателем наличия хронического заболевания, поскольку набор генов у женщины и мужчины является врожденным и не меняется в течении жизни. Цена исследования является доступной и позволяет выявить несовместимость на биологическом уровне между супругами на ранних стадиях развития проблемы.HLA типирование супругов. Что это такое, цена, анализ на генетическую совместимость, классы, расшифровка, как подготовиться

Безрезультатные попытки завести ребенка в течении длительного времени неблагоприятно сказываются на обоих супругах.

В случае непрохождения специального обследования на выявление диагноза несовместимости в паре могут появиться существенные осложнения:

  • из-за постоянных выкидышей и чисток у женщины в матке снижается вероятность закрепления плода, поскольку верхний слой ткани серьезно повреждается;
  • здоровье супруги падает в связи с частым приемом антибиотиков и гормональных препаратов, назначаемых для восстановления после выкидыша;
  • психологическое состояние женщины и мужчины значительно снижается, могут появиться взаимные претензии. В этой ситуации больше страдает самооценка женщины, у которой могут развиваться неврозы.

Чем дольше супруги откладывают решение возникшей проблемы с зачатием и вынашиванием, тем больше проблем со здоровьем накапливается у мужчины и женщины. Все это сказывается на дальнейшей возможности зачатия, поэтому специалисты рекомендуют уже при задержке беременности дольше 1 г или после 1 выкидыша немедленно обращаться к узкому специалисту за консультацией.

Супруги, имеющие проблемы с репродуктивной функцией в течении длительного времени, сдавшие анализ на HLA типирование, быстро проходят диагностику и выясняют причину проблем с деторождением.

Доступная цена исследования и развернутый результат анализа позволяют лечащему врачу выявить степень несовместимости и подобрать оптимальный способ лечения для достижения быстрого результата. Даже в сложных случаях существует большая вероятность для женщины после прохождения назначенного специалистом курса лечения удачно забеременеть, выносить и родить здорового малыша.

Видео о HLA типировании

HLA-типирование и репродукция:

определение, классы hla, анализ на совместимость

HLA (человеческие лейкоцитарные антигены) — это группа антигенов, которые входят в состав ДНК и отвечают за гистосовместимость. Человеческие лейкоцитарные антигены напрямую влияют на беременность. Некоторые комбинации HLА, образующиеся при слиянии яйцеклетки и сперматозоида, несовместимы с жизнью. Иными словами, из-за недостаточной гистосовместимости лейкоцитарных антигенов в оплодотворенной яйцеклетке процесс развития плода не идет, оплодотворенная яйцеклетка отмирает и вымывается из организма. Для диагностики совместимости супругов часто проводят тест — hla типирование.

hla типирование

Классы HLA

Ученые различают 3 класса HLA:

  1. Молекулы 1 класса. Они представляют собой пептиды, расположенные на поверхности клетки. Эти соединения образуются при разрушении белков в специальных комплексах, называемых протеасомами. Обычно длина всех пептидов составляет 9 аминокислот. Чужеродные гены ответственны за привлечение особых иммунологических компонентов (так называемые T-киллеры), которые уничтожают носителя антигена. Эти соединения присутствуют на поверхности всех клеток, кроме трофобластов и эритроцитов.
  2. Молекулы 2 класса. Они представляют собой антигены, которые располагаются за пределами клетки и отвечают за координацию между T-лимфоцитами и макрофагами. Часть генов также выполняет функцию по стимулированию деления T-хелперов (в свою очередь T-хелперы стимулируют B-клетки вырабатывать большое количество антител, чувствительных к определенному чужеродному антигену). Молекулы 2 класса локализованы на поверхности дендритных клеток и B-лимфоцитов.
  3. Молекулы 3 класса. Эти молекулы ответственны за кодирование информации, которая влияет на работу так называемой системы комплемента.

Функции HLA

У HLA такие функции:

  • Основная функция — иммунная. Если система HLA работает плохо или не работает совсем, нарушается синтез иммунных клеток, что приводит к тому, что человек становится уязвим перед множеством бактерий и вирусов, которые раньше не представляли никакой серьезной угрозы. Открытие HLA произошло в 1952 году, когда ученые изучали антигены лейкоцитов. Было установлено, что HLA-антигены представляют гликопротеиды, которые находятся на поверхности многих клеток организма, а кодируются они совокупностью генов, расположенных на 6 хромосоме. Также было установлено, что антигены 1 класса нужны и цитотоксическими Т-лимфоцитами для распознавания трансформированных клеток, а антигены 2 класса обеспечивают взаимодействие между Т-лимфоцитами и макрофагами при иммунном ответе. Также было установлено, что T-лимфоциты без участия HLA-генов не могут распознать и уничтожить чужеродный организм.
  • HLA также влияют на приживаемость органов при трансплантации.
  • HLA влияют на вероятность возникновения и скорость роста раковых опухолей.
  • Существуют исследования, которые показывают, что HLA также влияет на вероятность появления и развития таких аутоиммунных заболеваний, как сахарный диабет и целиакия.
  • Существует гипотеза, что HLA связаны с некоторыми телесными запахами, которые могут иметь роль при выборе полового партнера.

hla типирование супругов

HLA-совместимость

При слиянии сперматозоида и яйцеклетки плод получает по одной копии HLA от отца и матери. Фактически для иммунной системы эта новая клетка с уникальным генетическим кодом является чужеродной. Если бы в организм не беременной женщины попала клетка с таким генетическим кодом, то HLA-клетки, фактически выполняющую функцию разведчика, достаточно быстро бы выследили клетку-чужеземца и приказали бы лимфоцитам уничтожить ее. Однако при беременности этого не происходит. Почему?

Иммунная система матери не опознает клетки плода в качестве инородного тела. Это происходит из-за того, что В-лимфоциты синтезируют защитные антитела, которые направлены против отцовских HLA-антигенов. Данные защитные антитела блокируют активность HLA-антигенов отца, что приводит к тому, что для T-лимфоцитов эти клетки становятся неотличимыми от материнских. Это приводит к тому, что клетки плода благополучно приживаются в организме.

В большинстве случаев HLA-антигены отца благополучно блокируются. Однако иногда этот защитный механизм все же не срабатывает. Почему так случается? Объяснение этому следующие — на приживаемость плода напрямую влияет схожесть HLA-цепочки. Зависимость тут обратно пропорциональная — если HLA-цепочки у родителей очень похожи, то беременность в большинстве случаев закончится неудачно; и обратно — если HLA-цепочки у родителей сильно отличаются, то беременность в большинстве случаев закончится рождением здорового ребенка. Почему все именно так? Дело в том, что рождение ребенка с различными HLA-цепочками от родителей очень выгодно с точки зрения эволюции — такой ребенок будет реже болеть, поскольку он обладает как иммунитетом отца, так и матери.

Если HLA-цепочки у отца и матери схожи, врачу необходимо провести иммунотерапию, которая позволит избежать бесплодия из-за схожести HLA-цепочек. Лечение обычно представляет прием лекарственных препаратов (Интраглобин, Октагам и другие) в течение 2-3 месяцев. Также врачи советуют пройти еще один курс лечения при помощи таблеток после подтверждения беременности.

hla типирование 2 класса расшифровка результатов

HLA типирование

Высокая схожесть HLA-цепочек у отца и матери — частая причина бесплодия. Если семейная пара решила родить ребенка при помощи ЭКО, врачи могут назначить пройти HLA типирование — специальный тест, который покажет степень схожести HLA-цепочек у отца и матери. Фактически HLA типирование представляет анализ полиморфизма HLA. Анализ можно осуществить двумя способами:

  • Серологический метод HLA-типирования. Серологический метод основан на анализе антигенов. Для проведения анализа берется суспензия T-лимфоцитов (для определения антигенов 1 класса) и суспензия B-лимфоцитов (для определения антигенов 2 класса). Обычно для этого у будущих родителей берется кровь из вены. Чтобы выделить T- и B-лимфоциты из крови, врачи используют иммуномагнитную сепарацию или центрифугирование. Предпочтение отдается первому методу, поскольку при центрифугировании многие клетки крови гибнут. После отделения лимфоцитов от других компонентов крови врачи используют специальную сыворотку, которая реагирует только с определенными типами антител. Это позволяет точно определить состав HLA-цепочки. У этого метода следующие недостатки — пониженная экспрессия HLA-антигенов, вероятность возникновения перекрестных реакций и некоторые другие.
  • Молекулярно-генетический метод HLA-типирования. Этот метод основан на анализе участка 6 хромосомы ДНК, где расположены гены, отвечающие за синтез HLA. Молекулярно-генетический анализ проходит в несколько этапов. Сперва врач берет кровь из вены у отца и матери. Потом при помощи специальных манипуляций из крови выделяется чистая ДНК или лейкоцитарная суспензия. После этого проверяется реакция выделенной ДНК со специальными одноцепочечных ДНК, которые чувствительны лишь по отношению к HLA-локусу определенного типа. Использование данной методики позволяет получить точную копию ДНК. После получения точной копии ДНК врачи проводит визуальный анализ, который показывает, родит ли пара ребенка или нет. Молекулярно-генетический метод точнее серологического, поскольку при анализе используются стандартизированные образцы. Данный метод типирования обладает еще одним преимуществом — его результаты не только точны, но и подробны, что позволяет идентифицировать как антигены, так и аллели.

hla типирование 2 класса

Вывод

HLA (человеческие лейкоцитарные антигены) — это совокупность антигенов, расположенных на 6 хромосоме, которые выполняют множество функций. Многие люди могут знать, что от этих генов зависит приживаемость органов и тканей при пересадке. Однако лишь немногие знают, что HLA также влияет на способность к зачатию. Дело в том, что человеческие лейкоцитарные антигены выполняют иммунную функцию в организме — без их существования лимфоциты не могут опознать «чужие» клетки. Во время беременности HLA-клетки матери подавляют активность HLA-клеток отца, что приводит к тому, что лимфоциты не воспринимают клетки плода в качестве инородного организма. Однако это происходит лишь в случае, если HLA-наборы отца и матери отличаются друг от друга; если они идентичны, то плод уничтожается и вымывается из организма. Объяснение этому следующие — с точки зрения эволюции выгодно, чтобы у отца и матери были разные иммунные системы, поскольку это сильно повысит иммунные силы их ребенка.

Для определение способности к зачатию врачи могут назначить HLA типирование. HLA типирование — это специальный тест, который покажет, насколько лейкоцитарные антигены отца и матери схожи. Это позволяет определить причину бесплодия (хотя иммунная несовместимость является далеко не единственной причиной бесплодия). Существует два метода HLA-типирования — серологический и молекулярно-генетический. Первый метод основан на анализе самих антигенов, а второй — на анализе цепочки ДНК, которая и создает эти антигены. Второй вариант типирования понемногу вытесняет первый, поскольку он более точный и имеет гораздо меньше недостатков. Если тесты показали, что у родителей лейкоцитарная несовместимость, врач может назначить лечение. Лечение представляет собой прием специальных иммунных лекарств (Интраглобин, Октагам и другие), которые позволяют подавить активность HLA и лимфоцитов, что значительно повышает шансы на приживаемость плода.

Какие гормональные препараты вы принимали для стимуляции овуляции?

Poll Options are limited because JavaScript is disabled in your browser.

  • Гонал 33%, 3971 голос

    3971 голос 33%

    3971 голос — 33% из всех голосов

  • Клостилбегит 25%, 2985 голосов

    2985 голосов 25%

    2985 голосов — 25% из всех голосов

  • Менопур 16%, 1934 голоса

    1934 голоса 16%

    1934 голоса — 16% из всех голосов

  • Пурегон 14%, 1697 голосов

    1697 голосов 14%

    1697 голосов — 14% из всех голосов

  • Прегнил 8%, 984 голоса

    984 голоса 8%

    984 голоса — 8% из всех голосов

  • Меногон 3%, 364 голоса

    364 голоса 3%

    364 голоса — 3% из всех голосов

Всего голосов: 11935

Голосовало: 8774

17 января, 2018

×

Вы или с вашего IP уже голосовали.

суть исследования, подготовка, проведение и расшифровка результатов

родители с ребёнкомродители с ребёнком

При неудачных попытках родить ребёнка супруги задаются вопросом — в чём причина? Первичные анализы и исследования часто не могут ответить на него. Для выявления проблемы врачи дополнительно назначают HLA-типирование пары. Иммунологическая идентичность родителей становится серьёзным препятствием на пути к рождению ребёнка.

Актуальность генетических анализов

ДНКДНК

Генетические анализы — наиболее современный метод выявления заболеваний и отклонений у человека

Вся информация о человеке, его особенностях развития, склонностях к заболеваниям зашифрована в молекуле ДНК. В настоящее время существуют сотни генетических тестов, позволяющих быстро выявить причину отклонений в здоровье и даже спрогнозировать их появление в будущем. В пренатальной диагностике такие анализы используются для раннего выявления наследственных заболеваний плода и «совместимости» супругов.

Типы и свойства HLA

HLA (Human Leucocyte Antigens), что в переводе с английского означает человеческий лейкоцитарный антиген, отвечает за реакцию гистологической совместимости. У нас всех есть свой набор HLA-молекул и HLA-генов. Дети получают половину HLA-генов от мамы и папы.

Самыми распространёнными являются «классические» и «неклассические» гены HLA. В данной статье для нас представляют интерес первые, а точнее, HLA II класса, основная функция которых сводится к антигенному распознаванию и межклеточному взаимодействию, обеспечению устойчивости человека к инфекциям. Но у них есть и минусы — они могут стать причиной аутоиммунных заболеваний и проблем во время беременности.

Роль HLA в протекании беременности

Для полноценного вынашивания ребёнка антигены отца и матери должны различаться. Зародыш, сформированный в результате соединения родительских половых клеток, обладает специализированными антигенами, «чужими» для иммунитета матери. Организм женщины реагирует на новые клетки ребёнка включением особых механизмов, защищающих плод: синтезируются антитела-протекторы, подавляющие специализированные NK-клетки-киллеры. Если этого не происходит, последние начинают убивать зародыш, что приводит к прерыванию беременности.

Если антигены отца и матери совпадают, то ребёнок будет носителем антигенов идентичных материнским. В таком случае женский организм считает клетки зародыша своими, а значит, не запускает защитные механизмы для сохранности плода. Иммунитет воспринимает плод как некое опухолевое заболевание и пытается его уничтожить или приостановить деление клеток. В обычной жизни это спасает нас от многих заболеваний, но в этом случае становится причиной некроза в тканях зародыша и приводит к выкидышу.

Комплекс гистосовместимости оказывает влияние на сам процесс оплодотворения, прикрепление зародыша и вынашиваемость плода. Существует прямая зависимость: чем больше аллелей HLA-генов оказалось схожим у супругов, тем больше риск выкидыша. Около 35% пар с повторяющимися случаями выкидыша имеют по 2–3 совпадения. Если обнаружено четыре и больше сходных аллелей, то невынашиваемость и безуспешные попытки ЭКО будут почти во всех случаях.

Для полноценного вынашивания плода очень важно не только количественное совпадение у родителей, но и сами аллели HLA-генов у каждого из супругов. Так, в парах с тремя и более выкидышами при расшифровке результатов NLA-типирования выявлено увеличение числа некоторых аллелей: у женщин – DQB1 0301, 0501, 0602; у мужчин – DRB1 10, 12; DQA1 0102, DQA1 0301, 0102; DQB1 0501, 0602. При повторяющихся выкидышах уменьшается частота аллелей DRB1 03 и DQB1 0303 как у женщин, так и у мужчин, что говорит об их защитном эффекте на течение беременности.

Показания к HLA-типированию

HLA-типирование не является стандартной процедурой при беременности. Этот тест назначают только в случаях с постоянным невынашиванием плода и при повторяющихся неудачах экстракорпорального оплодотворения.

Его проведение иногда рекомендовано только отцу, т. к. некоторые варианты антигенов приводят к отклонениям во время сперматогенеза и отрицательно сказываются на качестве половых клеток, что влияет на развитие плода.

Метод проведения

ПЦРПЦР

Полимеразная цепная реакция — высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики

Для проведения генетического анализа супруги должны сдать кровь из вены. Из собранного материала будут выделены лейкоциты. Анализ проводят методом цепной полимеразной реакции (ПЦР). Врач-генетик на основе полученных результатов будет устанавливать степень иммунологической совместимости родителей.

Расшифровка результатов

Результат HLA-типированияРезультат HLA-типирования

В данном варианте у супругов 3 совпадения по вариантам HLA-антигенов

Полная иммунологическая несовместимость устанавливается, если у пары получен высокий процент совпадений (пять и более из шести возможных в трёх локусах, имеющих по 2 варианта в каждом из локусов) среди генов DRB1, DQA1, DQB1. При частичной несовместимости результат не может быть назван главной причиной выкидышей. Полное несовпадение партнёров — положительный результат, идеальный для беспроблемного протекания беременности.

Иммунотерапия при совпадении анализов в паре

Методы сохранения беременности при иммунологической идентичности родителей были придуманы несколько десятилетий назад. Один из способов — вшивание ткани отца беременной женщине. Иммунитет начинал атаковать не плод, а инородные ткани. В дополнение проводилась чистка крови и подавление иммунитета матери.

Иммунизация беременнойИммунизация беременной

Иммунизация — самый распространённый метод борьбы с HLA-идентичностью супругов

Сейчас возможны другие варианты поддержания беременности и защиты плода. После получения результатов лечащий врач может порекомендовать использовать иммунизацию. Существует два вида иммунизации — активная и пассивная.

  1. При активной женщине вводятся концентрированные лимфоциты супруга. Таким образом, организм будущей матери постепенно учится узнавать клетки мужа. Некоторые исследования приводят данные о 60% положительных результатов при вовремя проведённой процедуре.
  2. Пассивная иммунизация проводится специальными препаратами иммуноглобулинов (Октагам, Интраглобин, Иммуновенин и др.) Начинается процедура до зачатия, длится два — три месяца. Затем прописываются поддерживающие беременность курсы. Этот метод используется при экстракорпоральном оплодотворении.

Типирование HLA-генов супругов (видео)

Генетический анализ на HLA-антигенную совместимость супругов поможет выяснить, является ли бесплодие или невынашивание следствием генетической несовместимости пары. В случае подтверждения диагноза не теряйте надежду: современная медицина зачастую способна решить эту проблему и помочь в появлении на свет здорового малыша. Иммунизация матери является распространённым методом борьбы с генетической идентичностью родителей по HLA-антигенам.

Екатерина СергеевнаЕкатерина СергеевнаВысшее образование в сфере биологии (СПбГУ, магистр биологии), специализация — генетика человека. Оцените статью: Поделитесь с друзьями!

Типирование генов гистосовместимости человека (HLA) II класса: DRB1, DQA1, DQB1

Гены гистосовместимости (тканевой совместимости), или гены HLA II класса — могут определять развитие некоторых заболеваний (гепатит В, инсулинзависимый сахарный диабет (I типа), ревматоидный артрит), а также риск невынашивания (ранней потери) плода при беременности.

Синонимы русские

Типирование генов комплекса тканевой совместимости, локусы генов HLADR, DQ, комплекс человеческих лейкоцитарных антигенов II класса.

Синонимы английские

HLA- DRB1, DQA1, DQB1,  HLA II — human leukocyte antigen II, MHC – major histocompatibility complex II.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Буккальный (щечный) эпителий, венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Специальной подготовки к исследованию не требуется.

Общая информация об исследовании

Исследование выполняется с использованием полимеразной цепной реакции с аллельспецифическими праймерами. Учет результатов реакции проводится с автоматически использованием детектирующих амплификаторов в режиме реального времени (RealTime).

Гены гистосовместимости (тканевой совместимости), или гены HLA II класса, расположены на коротком плече 6-й хромосомы и локализованы в несколько генетических кластеров: DRA, DRB, DQA, DQB, DPA, DPB и т.д. Эти гены крайне полиморфны в популяции, например, для локуса DPВ описано около 124 алелей, а для локуса DRB – более 440. Каждый аллель имеет собственный номер в классификации, который идентифицируется при типировании. У каждого человека каждый локус представлен парой генов. Продуктами работы генов являются полипептидные цепи – альфа (от генов с маркером А) и бета (от генов с маркером В). Альфа- и бета-цепи формируют единую функционально активную структуру на поверхности клеток – HLA-молекулу II класса. Эти молекулы преимущественно экспрессированы на так называемых профессиональных антигенпрезентирующих клетках, к которым относятся макрофаги, дендритные клетки и В-лимфоциты. Эти клетки, используя HLA-молекулы II класса, участвуют в генетическом контроле практически всех иммунных реакций, способствуя их развитию или нарушая их. Нарушение функций иммунной системы является важнейшей составляющей большого количества заболеваний (онкологических, воспалительных и дистрофических). Выраженные нарушения реализуются в патологическое состояние с клиническими признаками. Таким образом, спектр и специфичность HLA молекул II класса определяют развитие определенных заболеваний. Необходимо отметить, что спектр этих молекул не является «гарантией» проявления патологического процесса, а только лишь определяет риск его развития.

В клинической практике существуют два показания для данного исследования.

1. Расчет риска развития заболеваний в группах риска. Например, носители аллеля HLA-DRB1*1302 имеют повышенную способность к элиминации вируса гепатита В. Высокий риск развития инсулинзависимого сахарного диабета (I типа) связан с наличием аллелей DQ8 и DQ2. Причем наличие обоих этих аллелей увеличивает риск развития заболевания. Наличие в генотипе аллеля DR4 является фактором риска развития ревматоидного артрита, а наличие у этих пациентов аллеля DR2, наоборот, оказывает защитный эффект.

2. Оценка риска невынашивания (ранней потери) плода при беременности. 

HLA-типирование используют для диагностики причин невынашивания беременности и бесплодия. При репродуктивных нарушениях важно количество совпадений вариантов генов HLA II класса у супругов: чем их меньше, тем выше вероятность наступления беременности.

Согласно последним данным, исследование совпадений генотипов локусов HLA не входит в перечень рекомендаций при привычной потере беременности в связи с противоречивой информацией и отсутствием прогнозирования в лечении. Оценка значимости данного анализа в конкретной паре должна проводиться врачом-специалистом.

Выбор метода лечения осуществляется только врачом-иммунологом или репродуктологом на основании результатов полноценного обследования супружеской пары на все иммунологические причины нарушения фертильности.

Существуют также и другие показания к данному исследованию, например поиск донора при трансплантации костного мозга или поиск донора крови и ее компонентов для гипериммунизированного пациента. Однако эти исследования проводятся специализированными клиническим учреждениями.

Стоит также отметить, что заключение по степени риска развития заболевания или степени риска нарушения репродуктивной функции должно осуществляться только совместно с врачом-генетиком.

Для чего используется исследование?

  • Для выявления предрасположенности к развитию заболеваний:
    • аутоиммунный тиреоидит,
    • сахарный диабет 1 типа,
    • системная красная волчанка,
    • аутоиммунный гепатит,
    • первичный билиарный цирроз,
    • целиакия,
    • хроническая идиопатическая крапивница
  • При планировании семьи (оценка риска бесплодия).

Когда назначается исследование?

  • Однократно, в комплексной диагностике заболеваний.

Что означают результаты?

Полученные результаты не являются диагнозом, но необходимы для расчета степени риска развития патологии. Степень риска может рассчитать только специалист-генетик. На основании полученной информации лечащий врач может сделать клинические заключения в отношении диагноза, дальнейшего обследования и коррекции терапии.

Что может влиять на результат?

Лейкопения ниже 0,5х109, вызванная гематологическим заболеванием или приемом лекарственных препаратов (цитостатиков).

Важные замечания

Для данного маркера не существует понятия «норма» и «патология», т. к. исследуется полиморфизм гена.


Скачать пример результата

Также рекомендуется

Дополнительные исследования могут быть назначены врачом после постановки клинического диагноза.

Кто назначает исследование?

Врач-генетик, акушер-гинеколог, репродуктолог.

Литература

  1. Болдырева М. Н., Барцева О. Б., Курило Л. Ф., Ткаченко Э. Р., Алексеев Л. П., Адамян Л. В. Связь HLA-DRB1-генотипа с репродуктивными неудачами. Проблемы репродукции, 2010, № 6. Стр. 59-63.
  2. Барковский Д. HLA-система и нейроиммуноэндокринные факторы. Влияние на беременность и роды. Издательство Медпрактика-М, 2014. Стр. 374.

Типирование генов HLA II класса (локусы DRB1, DQA1, DQB1). Обследование пары на совместимость

array(19) {
[«catalog_code»]=>
string(6) «180043»
[«name»]=>
string(152) «Типирование генов HLA II класса (локусы DRB1, DQA1, DQB1). Обследование пары на совместимость»
[«period»]=>
string(1) «5»
[«period_max»]=>
string(2) «12»
[«period_unit_name»]=>
string(6) «к.д.»
[«cito_period»]=>
NULL
[«cito_period_max»]=>
NULL
[«cito_period_unit_name»]=>
NULL
[«group_id»]=>
string(6) «392581»
[«id»]=>
string(4) «8301»
[«url»]=>
string(96) «tipirovanije-genov-hla-ii-klassa-lokusy-drb1-dqa1-dqb1-obsledovanije-pary-na-sovmestimost-180043»
[«podgotovka»]=>
string(234) «

Взятие крови проводят не ранее чем через 3 часа после последнего приема пищи, допускается употребление негазированной воды.

»
[«opisanie»]=>
string(6573) «


Внимание!

  • Договор-заказ регистрируется на женщину, согласно заключенному договору-заказу бланк результата исследования выдается женщине (заказчику исследования). Результат исследования содержит информацию о статусе HLA обоих партнеров, с указанием на результате Ф.И.О. женщины и мужчины.
  • Для выполнения услуги необходимо наличие биологического материала обоих партнеров (кровь). Взятие биоматериала у каждого партнера оплачивается отдельно.
  • При электронной регистрации заказа требуется обязательное заполнение дополнительных полей с указанием Ф.И.О. и даты рождения мужчины.


Метод исследования: Полимеразная цепная реакция (ПЦР).


HLA-система (Human Leukocyte Antigens) – это главная система гистосовместимости. К HLA II класса относят локусы  HLA-DP, HLA-DQ и HLA-DR. Эти антигены располагаются на клетках, от которых зависит иммунологический ответ: на активированных Т-лимфоцитах, В-лимфоцитах, моноцитах, макрофагах и дендритных клетках.


В качестве одной из причин репродуктивных нарушений рассматривается комбинация определенных вариантов генов комплекса гистосовместимости (HLA). Аутоиммунные процессы, в том числе клинически бессимптомные, могут лежать в основе развития некоторых видов нарушений репродукции, таких как спонтанный аборт, неразвивающаяся беременность, бесплодие, раннее прекращение функции яичников.


Различие половых партнеров по вариантам генов HLA является одним из важных условий успешного наступления и вынашивания беременности. Сходство между собой по вариантам генов HLA партнеров ведет к увеличению вероятности появления плода с двойным набором одинаковых вариантов генов. Полное совпадение плода и матери по HLA-генам является неблагоприятным  фактором и повышает риск репродуктивной потери. В связи с этим, HLA-типирование пары для установления сходства между ними по вариантам генов HLA используют для диагностики причин репродуктивных неудач.

Показания исследованию:

  • при плановой подготовке к беременности;
  • при наличии в анамнезе двух и более прерываний беременности на ранних сроках, тяжёлых осложнений беременности (гестоз, задержка развития плода, внутриутробная гибель плода), неудачных попытках ЭКО; при подготовке к ЭКО.


Пример результата исследования:




Параметр

Результат

Типирование генов HLA II класса (локусы DRB1, DQA1, DQB1). Обследование пары на совместимость

См. таблицу.











HLA II класс-совместимость пары

HLA-гены

Женщина D114P0022

Мужчина D114P0023

Количество совпадений в паре

DRB1

*01

*15

1

*15

*16

DQA1

*0101

*0102

0

*0103

*0102

DQB1

*0501

*0502/*0504

0

*0601

*0602-8

Итого совпадений в паре

1


КОММЕНТАРИЙ: количество совпадений в паре (1) недостаточно для того, чтобы быть основной причиной репродуктивных нарушений.


Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации.

»
[«serv_cost»]=>
string(5) «11000»
[«cito_price»]=>
NULL
[«parent»]=>
string(3) «392»
[10]=>
string(1) «1»
[«limit»]=>
NULL
[«bmats»]=>
array(2) {
[0]=>
array(3) {
[«cito»]=>
string(1) «N»
[«own_bmat»]=>
string(2) «12»
[«name»]=>
string(29) «Кровь с ЭДТА муж»
}
[1]=>
array(3) {
[«cito»]=>
string(1) «N»
[«own_bmat»]=>
string(2) «12»
[«name»]=>
string(29) «Кровь с ЭДТА жен»
}
}
}

HLA-типирование и его роль при бесплодии :: SYL.ru

В статье рассмотрим, что представляет собой HLA-типирование супругов.

Часто муж и жена не могут найти причину того, почему у них не получается зачать или выносить ребенка. Первичные лабораторные исследования зачастую не дают ответов на подобный вопрос, и для выявления основных факторов, провоцирующих подобную проблему, специалисты в дополнительном порядке назначают HLA-типирование супругов. Иммунологическая идентичность пары становится существенным препятствием на пути к деторождению.

Актуальность генетического анализа

Генетические исследования — наиболее современная методика выявления патологий и наследственных отклонений у человека. Вся информация о его особенностях, склонности к развитию некоторых заболеваний зашифрована в ДНК. В настоящее момент существуют десятки генетических тестирований, позволяющих выявить причину нарушений здоровья и спрогнозировать их возникновение в будущем. В области пренатальной диагностики анализ на HLA-типирование применяется для раннего определения наследственных заболеваний будущего ребенка и совместимости родителей.

Свойства и типы HLA

HLA в переводе означает «лейкоцитарный человеческий антиген», который отвечает за реакции гистологической совместимости. У каждого человека имеется свой уникальный набор HLA-генов и HLA-молекул. Потомство получает половину HLA-генов от родителей.

Что такое HLA-типирование 2 класса? Наиболее распространенными являются «неклассические» и «классические» гены HLA. Интерес представляют первые HLA 2-го класса, основной функцией которых является антигенное распознавание и межклеточное взаимодействие, обеспечение устойчивости организма к инфекциям. Однако у них есть некоторые минусы – такие гены зачастую становятся причиной возникновения аутоиммунных патологий и проблем в период беременности.

Роль HLA-типирования при беременности

Для полноценного процесса вынашивания антигены матери и отца должны различаться. Эмбрион, сформированный вследствие соединения родительских клеток, обладает особыми антигенами, чужеродными для материнского иммунитета. Организм женщины при этом реагирует на новые клетки включением специальных механизмов, которые защищают плод: вырабатываются антитела-протекторы, которые подавляют специализированные NK – киллерные клетки. Если этот процесс по каким-либо причинам нарушается, последние начинают уничтожать эмбрион, что приводит к самопроизвольному прерыванию беременности. В случаях когда родительские антигены совпадают, ребенок будет являться носителем антигенов, аналогичных материнским. В этой ситуации женский организм считает эмбриональные клетки своими, а значит, в организме не запускаются защитные процессы для сохранности плода. Иммунитет женщины воспринимает плод как опухолевое заболевание и начинает процессы его уничтожения или приостанавливает деление клеток. В повседневной жизни это свойство антигенов спасает человека от развития многих заболеваний, однако в этом случае становится фактором возникновения некроза тканей зародыша и провоцирует выкидыш.

Комплекс гистосовместимости влияет на сами процессы оплодотворения, имплантацию зародыша в матке и вынашиваемость плода. Наблюдается прямая зависимость: чем больше HLA-генов оказалось у супругов схожими, тем больше риск наступления выкидыша. Около 30 % пар с повторяющимися выкидышами имеют по нескольку совпадений. Если обнаружено четыре и более сходных генов, то безуспешные попытки ЭКО и невынашиваемость будут отмечаться практически во всех случаях.

Для полноценного процесса беременности крайне важно не только количественное совпадение у супругов, но и сами аллели HLA-генов у них. Так, в семьях с тремя выкидышами при расшифровке HLA-типирования выявлено повышение числа некоторых антигенов: у женщин – DQB1 0501, 0301, 0602; у мужчин – DRB1 12,10; DQA1 0102, DQA1 0102, 0301; DQB1 0602, 0501.

Показания к проведению

HLA-типирование 2 класса не является стандартной манипуляцией при беременности. Данный тест назначается только в случаях постоянного невынашивания плода и при часто повторяющихся неудачных попытках экстракорпорального оплодотворения.

Его осуществление иногда рекомендовано только отцам, поскольку некоторые вариации антигенов приводят к развитию отклонений во время сперматогенеза и негативно сказываются на качестве и свойствах половых клеток, что оказывает значительное влияние на развитие плода.

Как осуществляется HLA-типирование?

Методика проведения

Полимеразная цепная реакция является высокоточной методикой молекулярно-генетического диагностирования не только бесплодия, но и многих других патологий.

Для проведения данного генетического исследования супруги должны сдать венозную кровь. Из собранного материала выделяются лейкоциты. Анализ проводится методом ПЦР. Специалист-генетик на основе полученной информации будет устанавливать уровень иммунологической совместимости семейной пары.

Расшифровка HLA-типирования

Что означают результаты данного исследования?

Абсолютная иммунологическая несовместимость определяется, если у супругов получен высокий уровень совпадений (пять из шести возможных) среди генов DQA1, DRB1, DQB1. При неполной несовместимости результат исследования не может считаться основной причиной самопроизвольных выкидышей. Абсолютное несовпадение супругов — положительный результат, который идеален для беспроблемного течения беременности.

Расшифровку HLA-типирования 2 класса должен проводить только высококвалифицированный специалист.

Иммунотерапия при совпадении антигенов

Методики сохранения беременности при иммунной идентичности родителей были разработаны несколько десятков лет назад. Один из способов — вшивание беременной женщине тканей отца. Иммунитет начинал после этого атаковать не плод, а инородную ткань. В качестве дополнения проводилась очистка крови и подавление иммунной системы матери.

Перед беременностью необходимо вылечить воспалительные процессы, потому что присутствие инфекции активизирует иммунную систему.

В первой фазе цикла проводится лимфоцитоиммунотерапия лимфоцитами мужа (подкожно вводятся лейкоциты отца). Если супруг болен гепатитом или иными вирусными патологиями, используются донорские лимфоциты. Лимфоцитоиммунотерапия эффективна при наличии 4 и больше совпадений и повышает шанс беременности в 3 раза. Во второй фазе цикла проводится лечение дидрогестероном.

Иммунизация беременной женщины

Иммунизация – наиболее распространенная методика борьбы с HLA-идентичностью. Но на сегодняшний день возможны иные варианты поддержания беременности. После получения результатов исследования врач может рекомендовать применение иммунизации, которая бывает пассивной и активной.

При активной будущей матери вводят концентрированные лимфоциты мужа. Таким образом, ее организм учится узнавать клетки супруга. Некоторые научные исследования приводят данные о 55 процентах положительных результатов после проведенной процедуры.

Пассивную иммунизацию проводят при помощи специальных препаратов — иммуноглобулинов («Интраглобин», «Октагам», «Иммуновенин» и др.). Начинается такая процедура до зачатия, продолжается около трех месяцев. После этого прописываются курсы, поддерживающие беременность. Подобная методика применяется при осуществлении экстракорпорального оплодотворения.

Генетический анализ на антигенную совместимость пары поможет выяснить, является ли невынашивание или бесплодие следствием генетической несовместимости людей. В случае подтверждения этого не следует терять надежду на деторождение: современная медицина, благодаря многочисленным научным испытаниями и разработкам ученых-генетиков, способна решить такую проблему и помочь супругам выносить и родить здорового малыша. При этом родителям необходимо учесть, что им предстоит очень долгий процесс прохождения обследований и в случае наступления беременности постоянное наблюдение у специалиста.

Анализ на генетическую совместимость супругов. Расшифровка результатов HLA-типирования супругов Расшифровка анализа hla типирование на совместимость

В практике акушера-гинеколога встречаются случаи, когда у относительно здоровых супругов долгое время не получается завести совместного ребенка. При изучении данных статистки оказалось, что 70-80 % таких ситуаций обусловлены иммунологической несовместимостью родителей. Документально зафиксировано, что в браке с другими людьми, у таких супругов рождались здоровые дети без помощи медицины.

Актуальность проблемы бесплодия и невынашивания беременности приводит к поиску новых способов решения данной патологии. В последнее время становится «модным» направлять отчаявшиеся супружеские пары на HLA-типирование. Целевая аудитория потенциальных клиентов этого обследования растет с каждым годом. Для чего нужно и как проводится это исследование? Что делать супругам, которые выполнили долгожданный анализ и узнали нерадостные результаты?

Иногда причиной бесплодия считают биологическую несовместимость супругов.

Отдельные теоретические аспекты

HLA (human leucocyte antigens – антигены лейкоцитов человека) определяют MHC (major histocompatibility complex — главный комплекс гистосовместимости).

Было установлено, что на поверхности лейкоцитов есть особые антигены, которые способны распознавать чужеродные клетки и уничтожать их для защиты собственного организма. Это свойство позволяет своевременно распознавать миллионы вирусов, бактерий и аномальных клеток, с которыми иммунная система сталкивается каждый день.

Антигены HLA представляют собой сложные белки, которые состоят из нескольких отдельных участков. Каждый такой участок закодирован определенным видом гена (научный термин — аллелем).

Выделяют три класса таких HLA-антигенов. Проводится HLA-анализ первых двух классов (HLA-A, HLA-В, HLA-С и DP, DR, DQ). Третий класс антигенов расположен не на поверхности клеток, а в плазме крови и отвечает за неспецифическую иммунную защиту.

Каждый человек индивидуален и обладает разными вариантами одного и того же гена. Генетический полиморфизм (разнообразие) повышает тот факт, что при рождении человек наследует разные варианты генов от матери и от отца.

На сегодняшний день практически невозможно подсчитать все варианты комбинаций этих генов. А вероятность того, что встретятся два человека с похожими антигенами довольно низкая.

HLA-типирование проводят в специализированных клиниках.

Беременность и HLA

Анализ на HLA-совместимость партнеров становится очень актуальным в теме бесплодия. Всегда существуют случаи, когда у здоровой женщины наблюдается самопроизвольное прерывание беременности на ранних сроках. Большинство таких эпизодов остаются незамеченными и списываются на задержку менструации.

При ЭКО такие ситуации наблюдаются еще чаще, поскольку четко фиксируются докторами, ожидающими положительного результата. Отчаявшиеся женщины хотят знать причину, по которой произошло прерывание беременности и тут на помощь приходит HLA-анализ. Выясняется, что у супругов есть совпадение по нескольким генам. Повторимся еще раз, что это не означает, что пара несовместима, а просто у них среди нескольких тысяч комбинаций генов обнаружились схожие. Это не повод искать проблему и говорить о биологической несовместимости супругов.

Происхождение теории биологической несовместимости

Исследование проведенные на животных показали, что чаще всего оплодотворение происходит в случаях когда и обладают разными комбинациями генов HLA. Природа стремится к выживанию и генетическому разнообразию, поэтому самое жизнеспособное потомство получается при браке с генетически непохожим партнером.

После отдельных исследований на поверхности сперматозоидов обнаружили антигены HLA, и была выдвинута гипотеза, что прерывание беременности связано с иммунологическим конфликтом биологически совместимой пары.

Нет доказанных данных о влиянии совместимости супругов на невынашивание беременности.

Среди предложенных вариантов лечения: переливание отмытых лимфоцитов супруга, подшивание кусочка кожи беременной, введение иммуноглобулинов во время беременности – ни один не показал доказанного результата.

В настоящее время такие способы признаны неэффективными, а анализ на HLA и иммунологическая коррекция не рекомендуются у супругов с привычным невынашиванием беременности.

Чем опасен такой анализ?

Не представляется возможным провести полный анализ на HLA у супругов, поскольку для этого необходимо затратить огромные средства и время.

Анализ, который выполняют в лабораториях, представляет собой упрощенную версию. Оценить совпадения и предположить, что именно они стали причиной проблем с бесплодием равносильно тому, что сходить к гадалке.

Главную опасность такой диагностики представляют неверные выводы и, как следствие, неправильное лечение супругов.

Такой анализ и HLA-типирование имеет определенный смысл, если у супругов кровнородственный брак. Тогда можно хотя бы примерно предположить риск развития проблем (от невынашивания беременности до рождения детей с генетической

HLA Понимание набора текста

2,1 года назад от

Соединенное Королевство

Я думаю, что в readme на сайте загрузки может быть ответ:

Данные HLA-типирования 1267 человек, связанных с проектом «1000 геномов» (таблица 1), охватывают 14 популяций.
охватывая 4 основные группы предков. После специфической ПЦР-амплификации экзоны секвенировали методом Сэнгера.
Последовательности сравнивали с доступной информацией о последовательностях в базе данных аллелей HLA для экзонов 2 и 3 для
класса I и в генах экзона 2 класса II, поэтому любой полиморфизм, встречающийся в экзоне 4 аллеля класса I или экзоне 3
гена II класса не исследовали. Неопределенность типизации между аллелями разрешена, поскольку HLA-A, HLA-B, HLA-C
генные продукты имеют идентичные последовательности в сайтах узнавания антигена экзона 2 и экзона 3.
Аналогичным образом для генов класса II,
Неопределенность типирования возникает, если продукты генов HLA-DRB1, HLA-DQB1 имеют идентичные последовательности в сайтах узнавания антигена экзона 2.
(См. Приложение S1 в дополнительных материалах для получения дополнительной информации). Версия базы данных аллелей, используемая в отчете, является
IMGT 2.26.0 (июль 2009 г.), действует с февраля 2010 г.

ftp: // ftp.1000genomes.ebi.ac.uk/vol1/ftp/technical/working/20140725_hla_genotypes/README_20140702_hla_diversity

В исходной статье тот же абзац

http://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0097282

Я предполагаю, что, поскольку последовательности экзонов 2 и 3 HLA-A (в данном случае это класс I) одинаковы для 7 упомянутых типов HLA, вам потребуется секвенировать экзон 4, чтобы получить точный аллель HLA.

Обозначение HGVS из IPD-IMGT / HLA

A 01: 01: 01: 01 * NM_002116.7: с. [203G> A; 271G> А; 282G> C; 299Т> С; 301G> А; 341С> А; 385Т> С; 489G> А; 521С> Т; 527A> C; 538Т> С; 539T> G; 545C> T; 555T> G; 559А> С; 560C> G; 570G> C; 571T> G; 1077C> T]

A 01: 01: 01: 02N * NM_002116.7: c. [203G> A; 271G> А; 282G> C; 299Т> С; 301G> А; 341С> А; 385Т> С; 489G> А; 521С> Т; 527A> C; 538Т> С; 539T> G; 545C> T; 555T> G; 559А> С; 560C> G; 570G> C; 571T> G; 1077C> T]

A 01: 04N (A 01: 04: 01: 01N) NM_002116.7: с. [203G> A; 271G> А; 282G> C; 299Т> С; 301G> А; 341С> А; 385Т> С; 489G> А; 521С> Т; 527A> C; 538Т> С; 539T> G; 545C> T; 555T> G; 559А> С; 560C> G; 570G> C; 571T> G; 627_628dupC; ; 1077C> T]

A * 01: 22N NM_002116.7: c. [203G> A; 271G> А; 282G> C; 299Т> С; 301G> А; 341С> А; 385Т> С; 489G> А; 521С> Т; 527A> C; 538Т> С; 539T> G; 545C> T; 555T> G; 559А> С; 560C> G; 570G> C; 571T> G; 750G> C; 751delG]

A * 01: 32 NM_002116.7: с. [203G> A; 271G> А; 282G> C; 299Т> С; 301G> А; 341С> А; 385Т> С; 489G> А; 521С> Т; 527A> C; 538Т> С; 539T> G; 545C> T; 555T> G; 559А> С; 560C> G; 570G> C; 571T> G; 622C> A]

A 01: 34N (A 01: 01: 38L) NM_002116.7: c. [203G> A; 271G> А; 282G> C; 299Т> С; 301G> А; 341С> А; 385Т> С; 489G> А; 521С> Т; 527A> C; 538Т> С; 539T> G; 545C> T; 555T> G; 559А> С; 560C> G; 570G> C; 571T> G; 705G> А; 1077C> T]

A * 01: 37 NM_002116.7: с. [203G> A; 271G> А; 282G> C; 299Т> С; 301G> А; 341С> А; 385Т> С; 489G> А; 521С> Т; 527A> C; 538Т> С; 539T> G; 545C> T; 555T> G; 559А> С; 560C> G; 570G> C; 571T> G; 755С> Т; 1077C> T]

• ссылка

написано
2,1 г. назад, автор:

Гарант • 620

.

HLA-DRA — антиген гистосовместимости HLA класса II, предшественник альфа-цепи DR — Homo sapiens (человек)

HLA-DRA

Homo sapiens (человек)

Оценка за аннотацию:

вне оценки аннотации: 5

Оценка аннотации обеспечивает эвристический критерий содержания аннотации записи или протеома UniProtKB. Эту оценку нельзя использовать в качестве меры точности аннотации, поскольку мы не можем определить «правильную аннотацию» для любого данного белка.

Подробнее …

-Экспериментальные данные на уровне белка и

Это указывает на тип доказательств, подтверждающих существование белка. Обратите внимание, что свидетельство «существования белка» не дает информации о точности или правильности отображаемых последовательностей.

Подробнее …

Выберите раздел слева для просмотра содержимого.

В этом разделе представлена ​​вся полезная информация о белке, в основном биологическая информация.

Подробнее …

Function i

Связывает пептиды, производные от антигенов, которые достигают эндоцитарного пути антигенпрезентирующих клеток (APC), и представляет их на поверхности клетки для распознавания CD4 T-клетками. Пептид-связывающая щель вмещает пептиды из 10-30 остатков.Пептиды, представленные молекулами MHC класса II, образуются в основном в результате деградации белков, которые достигают эндоцитарного пути, где они процессируются лизосомными протеазами и другими гидролазами. Экзогенные антигены, которые были эндоцитозированы APC, таким образом, легко доступны для презентации через молекулы MHC II, и по этой причине этот путь презентации антигена обычно называют экзогенным. Поскольку мембранные белки на своем пути к деградации в лизосомах в рамках их нормального обмена также содержатся в эндосомальных / лизосомных компартментах, экзогенные антигены должны конкурировать с антигенами, происходящими из эндогенных компонентов.Аутофагия также является источником эндогенных пептидов, аутофагосомы конститутивно сливаются с загрузочными отсеками MHC класса II. Помимо APC, другие клетки желудочно-кишечного тракта, такие как эпителиальные клетки, экспрессируют молекулы MHC класса II и CD74 и действуют как APC, что является необычным признаком желудочно-кишечного тракта. Чтобы получить молекулу MHC класса II, которая представляет антиген, три молекулы MHC класса II (гетеродимеры альфа- и бета-цепи) связываются с тримером CD74 в ER с образованием гетерононамера.Вскоре после попадания этого комплекса в эндосомальную / лизосомную систему, где происходит процессинг антигена, CD74 подвергается последовательной деградации под действием различных протеаз, включая CTSS и CTSL, оставляя небольшой фрагмент, названный CLIP (ассоциированный с классом II инвариантный цепной пептид). Удаление CLIP облегчается HLA-DM посредством прямого связывания с комплексом альфа-бета-CLIP, так что CLIP высвобождается. HLA-DM стабилизирует молекулы MHC класса II до связывания первичных высокоаффинных антигенных пептидов. Молекула MHC II, связанная с пептидом, затем транспортируется на поверхность клеточной мембраны.В B-клетках взаимодействие между молекулами HLA-DM и MHC класса II регулируется HLA-DO. Первичные дендритные клетки (ДК) также экспрессируют HLA-DO. Лизосомное микроокружение участвует в регуляции загрузки антигена в молекулы MHC II, повышенное закисление вызывает усиленный протеолиз и эффективную загрузку пептидов.

Проект Генная онтология (GO) предоставляет набор иерархически контролируемых словарей, разделенных на 3 категории:

Подробнее…

GO — Молекулярная функция i

.

44 HLA TYPING И ТРАНСПЛАНТНАЯ ИММУНОЛОГИЯ | authorSTREAM

Rajeswari S. Модератор: Dr BIMAN SaIKIA:

Rajeswari S. Модератор: Dr BIMAN SaIKIA. Главный комплекс гистосовместимости (MHC) — это большое мультигенное семейство, продукты которого связаны с межклеточным распознаванием и с само- или несамо-дискриминацией. MHC имеет решающее значение для иммунологической специфичности, гистосовместимости и восприимчивости к аутоиммунным заболеваниям.У людей область MHC размером ~ 4 Mb (4 000 000 пар оснований) на хромосоме 6 содержит около 140 генов, более 20% из которых выполняют функции иммунитета. Демонстрирует обширную консервацию с MHC других млекопитающих (у мышей MHC называется комплексом H-2), что помогает понять MHC

Открытие MHC:

Открытие MHC MHC был обнаружен как генетический локус, продукты которого были ответственны для быстрого отторжения тканевого трансплантата, обмениваемого между инбредными линиями мышей. Конкретный локус, который был идентифицирован у мышей группой Снелла, был связан с геном на хромосоме 17, кодирующим полиморфный антиген группы крови, называемый антигеном II, и поэтому эта область была названа гистосовместимостью-2 или просто H-2.Гены, определяющие тканевую совместимость между людьми — гены гистосовместимости Джордж Снелл был удостоен Нобелевской премии в 1980 г.

Геном HLA ::

Геном HLA: 20% генов функциональны Самая генная область 20 генов HLA; 112 генов не HLA

Свойства молекул MHC ::

Свойства молекул MHC: Каждая молекула MHC состоит из внеклеточной пептид-связывающей щели пары иммуноглобулиновых (Ig) -подобных доменов, прикрепленных к клетке трансмембранным и цитоплазматическим доменами

Свойства Молекулы MHC ::

Свойства молекул MHC: Полиморфные аминокислотные остатки молекул MHC расположены в пептидсвязывающей щели и прилегают к ней. Неполиморфные Ig-подобные домены молекул MHC содержат сайты связывания для молекул Т-клеток CD4 и CD8

PowerPoint Presentation:

Feature Class I MHC Class II MHC Распределение на ядросодержащих клетках; максимум на В-клетках; очень низкие уровни в фибробластах, клетках печени, мышечных клетках, нейронах; В сперматозоидах на определенных стадиях и в клетках плаценты отсутствуют макрофаги, дендритные клетки и B-клетки, эпителиальные клетки тимуса, клетки Лангерганса.Полипептидные цепи α (44-47 кДа) β 2 — микроглобулин (12 кДа) α (32-34 кДа) β (29-32 кДа) полиморфные остатки и сайт связывания антигена Домены α1 и α2 Домены α1 и β1 Сайт связывания для T корецептор клетки α3 область связывает CD8 β2 область связывает CD4 Обработанный антигеном эндогенный белок Как эндогенный, так и экзогенный

Свойства взаимодействий MHC и пептидов ::

Свойства взаимодействий MHC и пептидов: молекулы MHC обладают широкой специфичностью в отношении связывания пептидов (тонкая специфичность упирается в ТКР).Каждая молекула класса I или класса II имеет единственную пептид-связывающую щель, которая может вмещать множество различных пептидов. Ассоциация пептида и желобка MHC представляет собой насыщаемое, низкоаффинное взаимодействие с медленной скоростью включения и очень низкой скоростью выключения. Молекулы пептида (якорные остатки или мотивы последовательностей) связываются со специфическими карманами (комплементарный остаток) в связывающей щели изоформы MHC.

Связывание пептидов молекулами MHC класса I и класса II:

Связывание пептидов молекулами MHC класса I и класса II Характеристика Класс I Пептид-связывающий домен класса II α 1 и α 2 α 1 и β 1 Природа пептид-связывающей щели Закрыты с обоих концов Открыты с обоих концов Общий размер связанных пептидов 8–10 аминокислот 13–18 аминокислот Пептидные мотивы, участвующие в якорных остатках на обоих концах пептида; обычно гидрофобные карбоксиконцевые якорные остатки Якорные остатки распределены вдоль связывания с молекулой МНС пептид Природа связанного пептида Расширенная структура, в которой оба конца взаимодействуют с расщелиной MHC, но средние дуги поднимаются от молекулы MHC. Расширенная структура, которая удерживается на постоянной высоте над дном щели MHC.

PowerPoint Presentation:

Класс I Класс II

Генетические характеристики HLA:

Генетические характеристики HLA

НАСЛЕДОВАНИЕ HLA ::

НАСЛЕДОВАНИЕ HLA: они следуют менделевскому наследованию. продукты обоих аллелей в локусе одинаково экспрессируются в клетке, и оба генных продукта могут представлять антигены Т-клеткам. Конкретная комбинация аллелей MHC, обнаруженная на одной хромосоме, известна как гаплотип MHC.

HLA-наследование ::

HLA-наследование: При отсутствии рекомбинации в потомстве возможны 4 различных гаплотипа. Тип наследования важен для совместимых доноров для трансплантации. Вероятность того, что два брата и сестры будут генотипически идентичны по HLA, составляет 25%. Вероятность того, что у любого пациента с «n» братьями и сестрами будет хотя бы один HLA-идентичный брат, составляет 1 — (3/4) n.

Наследование HLA:

Наследование HLA Наличие двух братьев и сестер дает априори шанс 44%, а наличие трех братьев и сестер дает 58% вероятность того, что один из братьев и сестер будет идентичным по HLA.Вероятность обнаружения HLA-идентичного брата никогда не будет 100%. Каждый раз, когда тестируется новый брат или сестра, этот новый брат имеет (только) 25% вероятность совпадения, независимо от того, сколько братьев и сестер ранее тестировалось.

РАЗНООБРАЗИЕ ГЕНОВ HLA ::

РАЗНООБРАЗИЕ ГЕНОВ HLA: MHC является полигенным: он содержит несколько разных генов MHC класса I и MHC класса II, так что каждый человек обладает набором молекул MHC с различными диапазонами специфичности связывания пептидов.MHC очень полиморфен; то есть существует несколько вариантов или аллелей каждого гена в популяции в целом. Фактически, гены MHC являются наиболее полиморфными генами из известных.

Презентация в PowerPoint:

MHC класса I и класса II являются полигенными (несколько продуктов кодирования локусов с практически одинаковой функцией) цепь a цепь a цепь b 2 микроглобулин не кодируется в MHC

Презентация PowerPoint:

полиморфизм MHC в бороздка связывания пептида объясняет предпочтение разных белков MHC для различных мотивов последовательности.Полиморфизмы в MHC показывают, как TCR распознают MHC-аллель-специфические эпитопы для ограниченного распознавания антигенов. Для MHC класса I домены a 2 и a 1 являются полиморфными; b 2 микроглобин и домен a 3 не полиморфны. Для класса II MHC домены b 1 полиморфны; Домены a 2 и b 2 не являются полиморфными. Аллельная вариация в MHC происходит на участке связывания пептида и на дне / сторонах бороздки

PowerPoint Presentation:

FOR 2010

Механизмы ::

Механизмы: Точечная мутация (замена замены / молчащие мутации) Конверсия генов Тандемная дупликация

Почему полиморфизм и полигенизм в MHC? :

Почему полиморфизм и полигенизм в MHC? Polygeny гарантирует, что каждый человек продуцирует ряд различных молекул MHC. Высокий полиморфизм классических генов MHC обеспечивает разнообразие экспрессии генов MHC в популяции в целом.Однако независимо от того, насколько полиморфен ген, ни один человек не может экспрессировать более двух аллелей в одном локусе гена.

PowerPoint Presentation:

Т-клетки специфичны для аминокислотной последовательности и молекулы MHC

MLR (реакция смешанных лимфоцитов) ::

MLR (реакция смешанных лимфоцитов): исследования показали, что примерно 1-10% всех T клетки человека будут реагировать на стимуляцию клетками другого, неродственного члена того же вида.Этот тип Т-клеточного ответа называется аллореакцией или аллореактивностью, потому что он представляет собой распознавание аллельного полиморфизма в аллогенных молекулах MHC, что объясняется смешанной реакцией лимфоцитов.

Неравновесие по сцеплению ::

Неравновесие по сцеплению: Ожидаемые частоты для гаплотипов HLA получают путем умножения частот каждого аллеля. , рассчитывается следующим образом:

Кроссинговер ::

Кроссинговер: гены HLA иногда демонстрируют кроссовер хромосом, при котором сегменты, содержащие связанный генетический материал, обмениваются между двумя хромосомами во время мейоза или гаметогенеза гаплотипов у потомства.Это связано с физическим расстоянием между генами и их устойчивостью или предрасположенностью к рекомбинации. Например, локусы HLA-A, HLA-B и HLA-DR близки друг к другу: 0,8% кроссовера между локусами A и B и 0,5% между локусами B и DR. Кроссоверы локусов HLA-B / HLA-C или локусов HLA-DR / HLA-DQ встречаются крайне редко

Номенклатура HLA, локусы и аллели:

Номенклатура HLA, локусы и аллели следующий формат: 1.Номенклатура HLA-антигенов (по серологии) 2. Номенклатура аллелей HLA (молекулярный метод) 25

СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ:

СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Номенклатура: Название молекулы HLA Порядок, в котором определена серологическая специфичность (например, HLA — старый серологический A9) специфичности были разделены (например, HLA — A9: A 23, A24). Наиболее узкое определение специфичности: подтип или ЧАСТНАЯ СПЕЦИФИЧНОСТЬ. Более широкие общие специфичности: супертипичные особенности. ТАК, ЧТО КЛЕТКА, ЭТО A9 +, ДОЛЖНА БЫТЬ ПОЛОЖИТЕЛЬНОЙ ДЛЯ A23 и A24.

НОМЕНКЛАТУРА АНТИГЕНОВ HLA ::

НОМЕНКЛАТУРА АНТИГЕНОВ HLA: Расщепление: Уточнение серологических методов позволило «разбить» антигены, которые, как ранее считалось, представляли одну специфичность, на специфичности, которые были серологически (а позже и генетически) различны. Перекрестно-реактивные группы (CREG): антигены HLA и группы антигенов могут иметь другие общие эпитопы. Антитела, которые реагируют с общими детерминантами, часто вызывают перекрестные реакции при серологическом тестировании.Собирательным термином для такой перекрестной реактивности является перекрестно-реактивная группа.

Типирование на основе серологии ::

Типирование на основе серологии: панель известных анти HLA-антител инкубируют с жизнеспособными лимфоцитами неизвестного типа HLA. Тип HLA образца определяется на основе характера уничтожения клеток (цитотоксичности), который является результатом реакции антигена антитела Преимущества: 1.Быстрый 2. Оценивает экспрессию HLA на поверхности клетки Недостатки: 1. Ограниченное обнаружение полиморфизма HLA и низкое разрешение 2.Требуются жизнеспособные клетки 3. Требуется экспрессия HLA на поверхности клеток

ОЦЕНКА ТЕСТА ЛИМФОЦИТОТОКСИЧНОСТИ:

ОЦЕНКА ТЕСТА ЛИМФОЦИТОТОКСИЧНОСТИ:

HLA АЛЛЛИЧЕСКАЯ НОМЕНКЛАТУРА специфического локуса 6 локуса — A, B, C, DR, DQ, DP. Аллель определяется как уникальная нуклеотидная последовательность для гена, определяемая использованием всех цифр в текущем имени аллеля.

МОЛЕКУЛЯРНОЕ ТИПИРОВАНИЕ: ПРИНЦИП:

МОЛЕКУЛЯРНОЕ ТИПИРОВАНИЕ: ПРИНЦИП Методы молекулярного HLA-типирования могут обнаруживать любую полиморфную нуклеотидную последовательность. Преимущества: соответствие уровня аллелей. Минимальное количество клеток, не требующих жизнеспособных клеток. реагенты могут быть созданы по мере обнаружения новых аллелей

Методы разрешения HLA — Диаграмма Венна:

Методы разрешения HLA — Диаграмма Венна Высокое разрешение: типирование HLA определяет конкретную последовательность ДНК сайта связывания антигена.Аллельное разрешение определяет одиночный аллель, определяемый уникальной последовательностью ДНК для гена HLA

МЕТОДЫ::

МЕТОДЫ: Методы Клиническое применение Разрешение SSP (ПЦР) Твердый орган, родственный и неродственный трансплантация HPC Серологический уровень аллеля, более высокое разрешение с большое количество праймеров Секвенирование ДНК Неродственная трансплантация HPC, решение проблем типирования с помощью других методов, характеристика новых аллелей SSOP-гибридизация на уровне аллелей Трансплантация твердых органов и HPC Серологический на уровень аллеля

РОЛЬ HLA ::

РОЛЬ HLA: Трансплантация твердых органов Трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток Аллоиммунизация у нескольких пациентов с переливанием крови Рефрактерность тромбоцитов Неонатальная аллоиммунная тромбоцитопения TRALI FNHTR TAGVHD HLA и аутоиммунное заболевание

Иммунологическая основа иммунологического ответа на трансплантат 4000 Степень иммунологического отторжения:

к трансплантату зависит от типа трансплантата.Следующие термины используются для обозначения различных типов трансплантатов: Аутологичные (собственные), например, костный мозг, стволовые клетки периферической крови, кожа, кость Сингенный (идентичный близнец) Аллогенный (другой человек, кроме однояйцевого близнеца) Ксеногенный (от одного вида к другому)

HLA и трансплантация гемопоэтических клеток ::

HLA и трансплантация гемопоэтических клеток:

GRAFT REJECTION:

GRAFT REJECTION Отторжение представляет собой сложный процесс, в котором играют роль как клеточный иммунитет (клеточный), так и циркулирующие антитела (гуморальные).Клеточное отторжение: острое и хроническое Аллораспознавание происходит двумя путями: Прямое и непрямое аллораспознавание

МЕХАНИЗМЫ АЛЛОРЕЗНОВАНИЯ:

МЕХАНИЗМЫ АЛЛОРЕЗНОВАНИЯ: ПРЯМО: Т-клетки реципиента трансплантата распознают аллогенные (донорские) молекулы МНС на поверхности трансплантат через дендритные клетки ДОНОРА. CD8 + Т-клетки распознают молекулы MHC класса I  активные CTL убивают трансплантаты. CD4 + хелперные Т-клетки распознают аллогенные молекулы класса II, пролиферируют и дифференцируются в эффекторные клетки T H 1 (и, возможно, T H 17).Цитокины, секретируемые активированными CD4 + Т-клетками, вызывают реакцию гиперчувствительности замедленного типа в трансплантате ——  повышенная проницаемость сосудов и локальное накопление мононуклеарных клеток (лимфоцитов и макрофагов), а также повреждение трансплантата АЛЛОРЕЗНОВАНИЯ: КОСВЕННО: Т-лимфоциты реципиента распознают антигены MHC донорских клеток после того, как они представлены собственными APC реципиента. Основной механизм  продукция цитокинов Т-клетками и гиперчувствительность замедленного типа.CD8 + CTL, которые могут генерироваться непрямым путем, не могут напрямую распознавать или уничтожать трансплантатные клетки, поскольку эти CTL распознают трансплантатные антигены, представленные APC хозяина. Прямой путь является основным путем при остром клеточном отторжении, а непрямой путь важен при хроническом отторжении. Это разделение ни в коем случае не является абсолютным.

PowerPoint Presentation:

ГУМОРАЛЬНОЕ ОТРАЖЕНИЕ: У ЧУВСТВИТЕЛЬНЫХ ПАЦИЕНТОВ (ГИПЕРАСТНЫЙ): Антитела, вырабатываемые против аллоантигенов в трансплантате, вызывают гуморальное отторжение  происходит в течение нескольких минут после трансплантации.почка быстро становится синюшной. Иммуноглобулин / комплемент откладываются в стенке сосуда  повреждение эндотелия и фибрино-тромбоцитарные тромбы. ПРЕДЫДУЩИЙ НЕ СЕНСИБИРОВАННЫЙ (ОСТРЫЙ): антитела вызывают комплемент-зависимую цитотоксичность, а ADCC вызывают васкулит отторжения и почечную атрофию

Болезнь трансплантата против хозяина — Трансплантация гемопоэтических стволовых клеток:

Болезнь трансплантата против хозяина Два — Трансплантация стволовых клеток, вызывающих проблемы с кроветворением уникальными для трансплантации костного мозга являются болезнь трансплантат против хозяина (GVH) и иммунодефицит.GVHD — сложное заболевание, возникающее в результате распознавания донорскими Т-клетками генетически несопоставимого реципиента, который не может отторгать донорские клетки после аллогенной HSCT. Критерии Биллингема: Иммуно-некомпетентный хозяин Инфузия компетентных донорских Т-клеток Несоответствие HLA между хозяином и донором

Факторы риска РТПХ:

Факторы риска РТПХ HLA и неродственные несоответствующие доноры Источник стволовых клеток Алло (больше с PBSC) Возраст донора Иммуносупрессия Повышенная доза ЧМТ Интенсивный режим кондиционирования Многократный донор Многоплодный донор-женщина / реципиент-мужчина

Заболеваемость:

Заболеваемость: Заболеваемость РТПХ у HLA-неидентичных доноров костного мозга, которые являются родственными или HLA-подобранными неродственными донорами  уровень 70 -90%.Хроническая GVHD наблюдается в 33% HLA-идентичных трансплантаций от родственных братьев и сестер, в 49% HLA-идентичных связанных трансплантаций, в 64% трансплантаций от совпадающих неродственных доноров. Частота может достигать 80% при неидентичных неродственных трансплантациях HLA с 1 антигеном (Аткинсон К. Хроническая реакция трансплантат против хозяина. Трансплантация костного мозга. Февраль 1990; 5 (2): 69-82)

PowerPoint Презентация:

стадий РТПХ

Стадии РТПХ:

Стадии РТПХ Сверхострый день 0-7 Острый день 7-100 Хронический день 100 ≥

Острый РТПХ:

Острая РТПХ Острая болезнь GVHD возникает в течение нескольких дней или недель после аллогенной трансплантация костного мозга.Хотя может быть затронут любой орган, основные клинические проявления возникают в результате поражения иммунной системы и эпителия кожи, печени и кишечника. Хотя повреждение тканей может быть серьезным, пораженные ткани обычно не инфильтрируются лимфоцитами. Считается, что помимо прямой цитотоксичности со стороны CD8 + Т-клеток, значительный ущерб наносят цитокины, выделяемые сенсибилизированными донорскими Т-клетками.

Острая РТПХ:

Острая РТПХ • Кожа: Макулопапулезные ладони / подошвы с зудом ± щеки / уши / шея / некроз туловища / пузыри • Печень: гипербилирубинемия • Желудочно-кишечный тракт: диарея

Острая боль в животе GVHD

Острая боль в животе. Классификация острой РТПХ

Хроническая РТПХ:

Хроническая РТПХ Многосистемное расстройство Клинические и патологические данные напоминают аутоиммунные заболевания

Патологическая классификация:

Патологическая классификация Ограниченная хроническая РТПХ Локализованная кожа Поражение печени Может не всегда требовать лечения и имеет благоприятный исход Обширный Хроническая РТПХ Генерализованное поражение кожи Дисфункция печени Агрессивный гепатит Поражение глаз Поражение желудочная железа Смертельный исход, если не лечить

Последствия хронической РТПХ:

Последствия хронической РТПХ Кожные (95%) случаи — увеличение отложений коллагена — атрофия дермы — развитие склероза — гиперпигментация — очаговое постоянное выпадение волос Пищевод: трудности при лечении глотание Пазухи — (увеличение риска бактериальных инфекций gram + ve Легкие — облитерирующий бронхиолит Тонкий кишечник (диарея, мальабсорбция) Вагинальные (воспаление, стриктура и стеноз) Другие системы: ЦНС, нефротический синдром, стойкий цистит Copyright Marvelle Brown

GVL EFFECT :

GVL EFFECT

Незначительные антигены гистосовместимости ::

Незначительные антигены гистосовместимости: Если донорские Т-клетки не истощены из трансплантата стволовых клеток, GVHD также часто возникает после трансплантации HLA-совпадающих стволовых клеток из-за распознавания второстепенных антигенов гистосовместимости. пептиды, которые отображаются молекулами HLA реципиента клетки.Эндогенные белки в реципиентных клетках, которые отличаются от белков донора из-за генетического полиморфизма, могут обеспечивать отдельные HLA-связывающие пептиды и служить второстепенными антигенами гистосовместимости для донорских Т-клеток. Идентификация ограниченных гемопоэзом минорных антигенов гистосовместимости, таких как HA-1, HA-2, HB-1 и BCL2A1, имеет решающее значение для сочетания таргетной иммунотерапии с трансплантацией аллогенных стволовых клеток.

PLS (синдром пассажирских лимфоцитов)::

PLS (синдром пассажирских лимфоцитов): три разные группы несовместимости по ABO  незначительная, основная и двунаправленная несовместимость по ABO.Большая ABO-несовместимость (например, A в O)  присутствие предварительно сформированных антидонорных A / B Ab, направленных против донорского ABO Ag, экспрессируемого на трансплантированных клетках. Реципиенты незначительной ABO-несовместимой трансплантации (например, O в A) экспрессируют ABO Ag, которые не экспрессируются у донора и подвержены риску реакций трансплантат против хозяина (GvH), таких как замедленный гемолиз эритроцитов реципиента (RBC) из-за PLS.

PLS ::

PLS: Двунаправленная несовместимость по ABO (например, A в B) представляет собой комбинацию основной и незначительной несовместимости по ABO и подвергает реципиента риску как по схеме «хозяин против трансплантата», так и по GvH.Иммунокомпетентные донорские В-лимфоциты с памятью вырабатывают антитела во вторичном иммунном ответе против эритроцитов реципиента. Считается, что массивное разрушение эритроцитов опосредовано комплементом. Возникает при трансплантации солидных органов. Обычно происходит через 1–3 недели после трансплантации и разрешается в течение 3 месяцев после трансплантации и является самоограничивающимся процессом.

Методы снижения иммуногенности аллотрансплантатов:

Методы снижения иммуногенности аллотрансплантатов Определение группы крови по системе АВО; Определение аллелей HLA, экспрессируемых на донорских и реципиентных клетках, называется тканевым типированием.Обнаружение у реципиента предварительно сформированных антител, которые связываются с антигенами идентифицированных лейкоцитов донора, называется перекрестным сопоставлением. Использование органов A2 с низкими титрами антител для реципиентов группы B и O. Ритуксимаб, спленэктомия, плазмаферез с внутривенным введением иммуноглобулина.

PowerPoint Presentation:

Почему печатать нужно? Соответствие MHC — глубокое влияние на выживаемость трансплантата перед современными иммуносупрессивными препаратами. Клинический опыт показал, что из всех локусов класса I и класса II соответствие только HLA-A, HLA-B и HLA-DR важно для прогнозирования результата.HLA-C не так полиморфен, как HLA-A или HLA-B, а HLA-DR и HLA-DQ находятся в сильном неравновесном сцеплении, поэтому совпадение по локусу DR часто также совпадает с локусом DQ. Типирование DP не является широко распространенным, и его важность неизвестна.

PowerPoint Presentation:

GRAFT SURVIVAL С HLA MISMATCH

Трансплантаты гемопоэтических клеток-предшественников ::

трансплантатов гемопоэтических клеток-предшественников: доноры и реципиенты-кандидаты типизированы для их HLA-A, -B, -B, Аллели DQ и, в некоторых случаях, их аллели HLA-DP.Сопоставление на уровне аллелей Некоторые программы трансплантации дополнительно пытаются сопоставить аллели HLA-DQ или -DP или и то, и другое. Молекулярное HLA-типирование выполняется на образцах как от донора, так и от реципиента для оптимальной оценки совместимости областей класса I и класса II.

CONT…:

CONT… Поскольку два кодоминно экспрессируемых аллеля наследуются для каждого из этих генов MHC, возможно иметь от нуля до шести несоответствий антигенов MHC между донором и реципиентом.Несоответствие нулевого антигена предсказывает лучшую выживаемость трансплантата живого донора, а трансплантат, соответствующий одному антигену, немного хуже. Выживаемость трансплантатов с двумя-шестью несоответствиями по MHC значительно хуже, чем с несоответствиями с нулевым или одним антигеном

Перекрестное соответствие:

Перекрестное соответствие Тест перед трансплантацией Обеспечивает отсутствие донорских реактивных антител Предотвращает сверхострое отторжение Предотвращает ускоренное отторжение, опосредованное антителами. Методы: серология (тест CDC) Твердофазные анализы (проточная цитометрия или технология микрочипов)

Презентация в PowerPoint:

СПАСИБО

.

16-точечное HLA-типирование с анализом длинных ампликонов v2

Презентация на тему: «Ввод HLA по 16 точкам с анализом длинных ампликон v2» — стенограмма презентации:

1

16-точечный ввод HLA с анализом длинных ампликонов, версия 2
Бретт Боуман, 14 сентября 2016 г.

2

Что такое набор текста HLA по 16 пунктам?
«Классические» белки MHC 3 CD8-презентирующих комплекса «MHC Class I» HLA-A, B, C 1 ген на AS 3 CD4-презентирующих комплекса «MHC Class II» HLA-DP, DQ, DR 2 гена на AS 2x 1x 1x

3

ПОВЕСТКА ДНЯ Анализ длинных ампликонов (LAAv2) Результаты 16-точечного HLA-секвенирования
Обзор Улучшения в LAAv2 для комплексного HLA-типирования Результаты 16-точечного HLA-секвенирования Дизайн эксперимента Типирование результатов Качество последовательности

4

Long Amplicon Analysis WorkFlow — обзор
Фильтрация подпотока Грубая кластеризация Каскадная кластеризация Тонкая фазировка Консенсус Постобработка Фильтры Выходные данные Фильтрация подпотока Грубая кластеризация Каскадная кластеризация Тонкая фазировка Консенсус Постобработка Фильтры Выводы Фильтрация подпотока Грубая кластеризация Фильтры водопада Постобработка Тонкая фазировка Выводит образец отчета об очистке аллелей локуса

5

Long Amplicon Analysis WorkFlow — грубая кластеризация и WATERFALL
Фильтрация подпотоков Грубая кластеризация Каскадная кластеризация Тонкая фазировка Консенсус постобработки Выводы Отфильтрованные подпотоки Кластеризация подпотоков Подпотоки водопада Кластер №1 Кластер №2 Кластер №3

6

Рабочий процесс анализа длинных ампликонов — точная фазировка и согласование
Фильтрация подпотоков Грубая кластеризация Каскадная кластеризация Тонкая фазировка Консенсус постобработка Выходные данные

8

Что такое набор текста HLA по 16 пунктам?
HLA Полная последовательность панельного экзона, только 2-этапная ПЦР 9 внешняя ПЦР ~ 45 внутренняя ПЦР Фазирование путем вывода 3-дневный оборот ~ QV30 Экспериментальный дизайн Повторное использование внешних праймеров 3.1 ~ 5,8 т.п.н. Геномные 7-локусы активного сайта полностью фазированы> QV50

9

АНАЛИЗ длинных ампликонов — РЕЗУЛЬТАТЫ ДЛЯ ПОЛНОЙ ПАНЕЛИ
Sequence gLen gType gPctId nMis Indel cLen cType cPctId Тип Cluster0_Phase0_NumReads192 3152 A * 34: 01: 01 100 1093 Cluster1_Phase4205_NumReads192: 1093 B * 40: 01: 02 Cluster2_Phase0_NumReads184 3460 C * 04: 03: 01 1096 Cluster3_Phase1_NumReads228 3445 C * 12: 03: 01: 01 C * 12: 03: 01 Cluster3_Phase0_NumReads215 4839 DPA1 * 01: 03: 01: 04 96.88 52 601 DPA1 * 02: 02: 02 Cluster4_Phase0_NumReads234 5801 DPB1 * 03: 01: 01 99.31 39 1 657 DPB1 * 01: 01: 01 Cluster5_Phase1_NumReads178 4572 DPB1 * 04: 02: 01: 02 99.47 18 6 Cluster6_Phase1_NumReadsA 02:01:01 99.97 613 DQA1 * 01: 02: 01 Cluster5_Phase0_NumReads240 5692 DQA1 * 03: 03: 01 99.95 3 Cluster7_Phase1_NumReads236 3768 DQB1 * 03: 05: 01 99.28 19 8618 DQB1 * 05: 02: 01 ClusterReadsB_Phase : 01: 01: 01 99.52 16 DQB1 * 05: 02: 01 Cluster8_Phase1_NumReads187 5105 DRB1 * 04: 03: 01 99.05 17 31 584 DRB1 * 04: 05: 01 Cluster7_Phase0_NumReads217 3893 DRB1 * 15: 01: 01: 03 DRB1 * 15: 02:01 Последовательность gLen gType gPctId nMis Indel cLen cType cPctId Тип Cluster0_Phase0_NumReads195 3138 A * 11: 01: 01: 01 100 1093 A * 11: 01: 01 Cluster1_Phase1_NumReads173 3153 A * 74: 02: 01: 02 99.84 5 A * 74: 01 Cluster1_Phase0_NumReads 189 5778 B * 07: 02: 01 1045 Cluster2_Phase1_NumReads179 3398 B * 53: 01: 01 Cluster2_Phase0_NumReads212 3424 C * 04: 01: 01: 01 1096 C * 04: 01: 01 Cluster3_Phase1_NumReads : 02: 01: 03 C * 07: 02: 01 Cluster4_Phase1_NumReads188 4830 DPA1 * 01: 03: 01: 02 97.06 103 40 601 DPA1 * 02: 01: 01 Cluster3_Phase0_NumReads230 4857 DPA1 * 01: 03: 01: 04 DPA1 * 01: 03:01 Cluster5_Phase3_NumReads200 4574 DPB1 * 02: 01: 02 99.58 18 1107 DPB1 * 01: 01: 01 Cluster4_Phase0_NumReads186 5800 DPB1 * 03: 01: 01 99.48 28 2657 DPB1 * 107: 01 Cluster5_Phase2_NumReads225 * 01: 01 DPB : 01 99.98 Cluster5_Phase1_NumReads220 5872 99,86 8 DPB1 * 04: 01: 01 Cluster5_Phase0_NumReads201 5751 DQA1 * 01: 02: 01: 04 99.93 3 613 DQA1 * 01: 02: 01 Cluster6_Phase1_NumReadsT228 5691 DQA1 cdPenMecLype ndequence nc: 03: 03: 03: 03: 03: 03: 03: 03 DQA1 DQA1 DQA1 DQA1 cPctId Тип Cluster0_Phase0_NumReads176 3138 A * 01: 01: 01: 01 100 1093 A * 01: 01: 01 Cluster1_Phase1_NumReads177 3152 A * 02: 01: 01: 01 A * 02: 01: 01 Cluster1_Phase0_NumReads228 3395 B * 08: 01: 01 1045 Cluster2_Phase1_NumReads189 B * 40: 01: 02 Cluster2_Phase0_NumReads171 3422 C * 03: 04: 01: 01 1096 C * 03: 04: 01 Cluster3_Phase1_NumReads200 3430 C * 07: 01: 01: 01 C * 07: 01: 01 Cluster3_Phase058 DPA1 * 01 : 03: 01: 02 602 DPA1 * 01: 03: 01 Cluster4_Phase0_NumReads193 4568 DPB1 * 04: 01: 01: 01 DPB1 * 01: 01: 01 Cluster5_Phase1_NumReads210 5875 99.95 1 2 657 DPB1 * 04: 01: 01 Cluster6_Phase1_NumReads210 5691 DQA1 * 03: 01: 01 613 Cluster5_Phase0_NumReads235 5799 DQA1 * 05: 01: 01: 02 610 DQA1 * 05: 01: 01 Cluster6_Phase0_NumReads231 994114 618 Cluster7_Phase1_NumReads210 3775 DQB1 * 03: 02: 01 99.92 Cluster7_Phase0_NumReads175 3686 DRB1 * 03: 01: 01: 01 584 DRB1 * 03: 01: 01

10

АНАЛИЗ длинных ампликонов — результаты класса I
HLA класса I 3 гена 3,1 ~ 3.ГДНК 4 т.п.н. ~ 1,5 т.п.н. активный сайт 3 Sanger rxns ea ~ QV30 Схема эксперимента 45x образцов Все гены класса I Полный геном Полностью фазированный> QV50

11

Введение — Анализ локусов
LociAnalysis -vv -n 16 -o OUTPUT_DIR —combineLoci DPB: DPB1: DPB ignoreLoci DPB1, DPB2, H —minLengthByLocus DRB4: DRLengthByLocus DRB4: maxClusterADSDB: maxClusterADSDB: maxClusterADS:БАМ

.

Отправить ответ

avatar
  Подписаться  
Уведомление о